小鼠胰島β細胞Min6科研說明書

細胞傳代（以下步驟適用于10cm皿）
①細胞培養至密度達80%以上時即可傳代，先將細胞培養基取出3mL用15mL離心管裝好，其他培養基全部吸干舍棄；
②培養皿加入2-3mL無菌PBS，輕輕晃動皿，使PBS浸洗到皿底所有部位，PBS吸干舍棄；
③加入1mL胰酶，輕輕晃動皿，使胰酶浸沒到皿底所有部位，將皿蓋好放入培養箱中消化；
④3min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞不再貼壁，即可加入*步收集的培養基混勻；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至不貼壁為止；
⑤將細胞懸液均勻分成幾份，分別加入不同培養皿中，補加新培養基后放回培養箱培養。
 

產品介紹

生長特性 貼壁

形態 梭形

培養基 90% RPMI-1640+10%FBS

生長條件 95%空氣+5% 二氧化碳   37攝氏度

凍存條件 90％FBS ＋10％DMSO

污染檢測 支原體、細菌、酵母和真菌檢測結果為陰性

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式：

（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；

（2）存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

細胞培養詳細步驟

收到常溫細胞后處理方法

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。
２. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，先不要打開培養瓶蓋，將細胞置于細胞培養箱內靜置培養２－４小時，以便穩定細胞狀態．

３. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，貼壁特性(貼壁/懸浮），細胞形態，所用基礎培養基．血清比例，所需細胞因子，傳代比例，換液頻率等．

４. 靜置完成后，取出細胞培養瓶，鏡檢，拍照，記錄細胞狀態(所拍照片將作為后續服務依據)建議細胞傳代培養后，定期拍照，記錄細胞生長狀態．

５. 貼壁細：若細胞生長密度超過８０％，可正常傳代，若未超過８０％，移除細胞培養瓶內培養基，預留５ＭＬ左右繼續培養，直至細胞密度達８０％左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松．

６. 懸浮細胞：將細胞培養瓶內液體全部轉移至５０ＭＬ無菌離心管內，１２００rpm離心５min,離心后上清培養基可收集備用，管底細胞沉淀加入５ml培養基吹打．重懸．鏡檢時，基細胞密度超過８０％，可將細胞懸液分至２個細胞培養瓶內培養，補加培養基至５ml;若細胞密度未超過８０％，將細胞懸液移至原瓶繼續培養，直至細胞密度達８０％左右時再進行傳代操作．

方     式： 詳詢經理

小鼠胰島β細胞Min6科研說明書

 內靜置培養過夜，隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們，信息確認后我們為您再免費寄送一次。

4. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件;建議直接購買提供的*培養基。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通交流。
培養溫馨提示：
1）公司努力實現為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代，不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2）公司細胞資源中心承諾盡zui大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件，中心不保證其準確性。
3）從文獻等處引用的信息本中心未進行核實，僅供參考。
 

 
注意事項：
1. 收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。